Культура нейронов гиппокампа
В исследованиях лаборатории Футермана использовали уникальную культуру нейронов, в которой аксоны и дендриты развиваются с помощью стереотипной последовательности событий, приводя к возрастанию уровня полностью дифференцированных нейронов, и в которой аксоны и дендриты могут различаться как биохимически, так и морфологически [ Dotti, С. G., Sullivan, С. A., ea., 1988 ].
Нейроны были получены из гиппокампа 18-дневных эмбрионов крыс и нанесены (с низкой и высокой плотностью) на стеклянные покровные стекла, покрытые поли-L-лизином. Эти стекла помещались в культуральную посуду, которая содержала монослой астроглий, но при этом стекла физически были отделены от глиального монослоя [ Goslin, К., and Banker, G. 1991 ].
Важно, чтобы культуры сохранялись в бессывороточной среде.
Эта культура нейронов гиппокампа хорошо охарактеризована в лаборатории Г. Банкера [ Goslin, К., and Banker, G. 1991 ].
Рост классифицирован в виде пяти отдельных стадий развития [ Dotti, С. G., Sullivan, С. A., ea., 1988 ].
В начальной стадии роста ( стадия 1 ) нейроны гиппокампа характеризуются наличием многих чешуйчатых ножек вокруг тела клетки.
При второй стадии развития отмечаются потеря чешуйчатых ножек и увеличение числа коротких отростков, обозначаемых как "минорные отростки" (стадия 2).
Через несколько часов один из минорных отростков начинает быстро расти (10-15 мкм/ч) и развивать аксональные характеристики ( стадия 3 ).
Аксоны в качестве дополнения образуют ветви и когда появляется новая ветвь, бугорок оригинального аксона теряет чешуйчатые ножки и удлинение останавливается. Дендриты развиваются при минорных отростках ( стадия 4 ).
Конечная стадия развития ( стадия 5 ) характеризуется образованием синаптических контактов между аксонами и дендритами.
Смотрите также:
