Рецепторы: исследования путем слияния клеток
Слияние клеток достигается либо с помощью вируса Сендая, либо с помощью химических агентов (например полиэтиленгликоля), вызывающих слияние плазматических мембран с образованием одной клетки из нескольких.
Слияние клеток, "некомпетентных" в отношении стероидных гормонов, с клетками, имеющими рецепторы стероидов, позволяет получить "гибрид", отвечающий на стероидные гормоны синтезом новых, ранее не синтезировавшихся белков.
С помощью метода слияния клеток было показано, что после инактивации мембранного рецептора в одной клетке, а аденилатциклазы - в другой можно получить гибридную клетку, аденилатциклаза которой имеет чувствительность к данному рецептору. Так впервые была достигнута реконструкция гормончувствительного аденилатциклазного комплекса. С помощью вируса Сендая в мембрану, содержащую аденилатциклазу, было встроено несколько разных рецепторов из других тканей и каждый из них сообщал ферменту чувствительность к соответствующему гормону. Следовательно, одна и та же молекула аденилатциклазы может взаимодействовать с самыми разнообразными мембранными рецепторами. В настоящее время известно несколько десятков гормональных рецепторов, которые могут регулировать активность аденилатциклазы. Эти рецепторы, по-видимому, имеют разные гормонсвязывающие участки, но общий домен, ответственный за взаимодействие с аденилатциклазным комплексом.
Смотрите также:
