Кинезин: Структура
В 1989 г. была впервые определена нуклеотидная последовательность гена тяжелой цепи кинезина дрозофилы и на основании ее была предсказана четвертичная структура молекулы кинезина.
Предполагается, что центральный сегмент тяжелой цепи формирует альфа-спираль, и в нативной молекуле альфа-спирали двух тяжелых цепей закручены друг относительно друга, образуя палочкообразную структуру. N- и С-концевые участки молекулы должны образовывать глобулярные домены . Эти данные согласуются с данными электронной микроскопии.
Методами негативного контрастирования и кругового оттенения платиной было показано, что молекула кинезина имеет форму стержня диаметром 2 - 4 нм и длиной 80 - 100 нм с двумя глобулярными головками на одном конце и веерообразным расширением на другом. В середине стержня находится шарнирный участок, в котором молекула может изгибаться. С помощью декорирования антителами с последующей электронной микроскопией было показано, что легкие цепи локализованы в веерообразном утолщении. Связывание антител с глобулярными головками подавляет транслокаторную активность кинезина. На основании этих данных было сделано предположение, что глобулярные головки содержат участок связывания с микротрубочками . Такое предположение подтверждается также данными молекулярно - генетического анализа, которые показали, что делеция N-концевого участка тяжелой цепи приводила к потере способности к связыванию с микротрубочками. Более того, экспрессированный in vitro N- концевой фрагмент тяжелой цепи размером около 50 кДа обладал механохимической активностью. Этот фрагмент был назван моторным доменом кинезина .
Клонированы три кДНК легких цепей кинезина из мозга крысы. Легкие цепи отличались только в С-концевой области и, вероятно, генерировались за счет альтернативного сплайсинга из одного гена.
Смотрите также:
