Простагландин F синтаза: общая характеристика
Простагландин F синтаза (Алкоголь дегидрогеназа (NADP+), [Спирт:NADP+ оксидоредуктаза, ЕС 1.1.1.2 ] ( Kuchinke, 1992 )).
K. Watanabe ( K.Watanabe, 1985 ) и L.Y. Chen (Chen, 1992) были выделены из легких и печени быка NADPH-зависимые PGD-11-кеторедуктазы, обладающие широкой субстратной специфичностью относительно различных кетопростагландинов и карбонильных соединений, альдокетонов ( нитроацетофенон , менадион , фенантренохинон и др.). Выделенные ферменты обладали также способностью восстанавливать 9aльфа,11aльфа-эндопероксидную группу PGH . При этом PGH2 и фенантренохинон оказались даже более специфическими субстратами по сравнению с PGD2 . Это и послужило основанием для того, чтобы обозначить новые ферменты как PGF-синтазы .
PGF-синтаза легких быка была очищена в 540 раз до гомогенного состояния путем фракционирования цитозольных белков сульфатом аммония и 4- х стадийной хроматографической очистки ( Watanabe K., 1985 ). Очищенный фермент представляет собой белок с молекулярным весом ок.30.5kDa. Значения изоэлектрической точки, pH оптимум и специфическая активность (PGD-11- кеторедуктазная активность) выделенного фермента были равными 6.8, 6-7 и 150нмоль*мин-1*мг-1, соответственно.
Выделенная из печени быка PGF синтаза с молекулярным весом 36kDa оказалась структурно, биохимически и кинетически близким PGF синтазе легких быка ферментом. Она также имела два независимых активных центра, ответственных за PGF-синтазную и PGD-/карбонилредуктазную функции фермента. Обнаружены лишь небольшие различия в свойствах PGF синтаз, выделенных из разных источников. PGF синтаза из печени быка характеризовалась более низким значением KM для PGD2 (10мкМ против 120мкМ), способностью к активации ионами хлора (PGD-/карбонилредуктазная функция фермента) и ингибированию CuSO4 и HgCl2 . Сравнение нуклеотидных последовательностей cDNA для обоих ферментов показало, что они отличаются только по 11 нуклеотидам ( Kuchinke, 1992 ).
Этот тип PGF синтазы был обнаружен также в опухолевых клетках толстой кишки ( Ciaccio, 1993 ). Выделенный фермент представляет собой белок с молекулярным весом 32.5kDa и последовательностью NH2-концевого фрагмента, идентичной в 19 аминокислотных остатках из 21 PGF синтазе из легких быка.
Смотрите также:
