Создание новых ферментов: цитохромы группы P-450
Возможность изменения субстратной специфичности путем замены отдельных аминокислот была продемонстрирована для цитохромов группы P-450.
Мышиные цитохромы P-45015альфа и P-450coh экспрессируются в клетках печени самок и почек самцов соответственно. Первый из них катализирует 15альфа-гидроксилирование дельта4-3-кетостероидов типа тестостерона, второй - гидроксилирование кумарина в положении 7. Несмотря на разную субстратную специфичность, оба фермента различаются лишь по 11 (из 494) аминокислотным остаткам. Осуществляя последовательные замены этих 11 аминокислот, установили, что замена единственной аминокислоты Phe-209 на Leu в полипептидной цепи цитохрома P-450coh приводит к появлению у него способности гидроксилировать стероиды, т.е. активности цитохрома P-45015альфа, и к потере способности использовать кумарин в качестве субстрата.
Смотрите также:
