Каналы ЦНЗ (циклонуклеотид-зависимые)
Выделение ЦНЗ-каналов было произведено методом, ставшим уже традиционным. Во-первых, белок 63 кДа был выделен из наружных сегментов палочек и колбочек быка. При встраивании этого белка в искусственный липидный бислой можно регистрировать ток через единичный канал в ответ на цГМФ. Далее, библиотека кДНК сетчатки испытывалась олигонуклеотидной последовательностью, представляющей отдельные участки белка. Был выделен клон, кодирующий 690 аминокислотных остатков. Когда он экспрессировался в ооцитах Xenopus , формировался функциональный ЦНЗ-канал. С использованием последовательностей, полученных из этого белка, из фоторецепторов позвоночных, обонятельного эпителия, а совсем недавно и ганглиозных клеток сетчатки, были выделены и многие другие ЦНЗ-каналы Чтобы определить, какие участки аминокислотной цепи локализованы в мембране, использовалась методика т.н. гидропатического анализа . При анализе ЦНЗ-каналов выявлено шесть гидрофобных сегментов, т.е. канал имеет шесть трансмембранных сегментов ( рис. 13.6 ). Такая молекулярная структура напоминает многие потенциал-зависимые каналы : К+, Na+, Са2+, Cl- и т.д. Более детальный анализ показал, что четвертый трансмембранный сегмент S4 строго гомологичен сенсору потенциала S4 потенциал-зависимых каналов. Здесь присутствует также т.н. ?-шпилька (петля ДНК) между сегментами S5 и S6. Надо напомнить (см. БАЗОВЫЕ КОМПОНЕНТЫ СЕНСОРНЫХ СИСТЕМ ), что похожий домен Н5 присутствует в потенциал-зависимых каналах, где, как предполагается, он контролирует тип иона, способного пройти через канал. В отличие от потенциал- зависимых каналов, ЦНЗ-каналы имеют большой С-концевой цитоплазматический домен, который связывается с вторичными мессенджерами - циклическими нуклеотидами . Предполагается, главным образом по аналогии с хорошо изученным К+-каналом , что четыре ЦНЗ-канальных белка, показанных на рис. 13.6 , образуют полный канал. Образован ли канал тетрамером одинаковых ЦНЗ- субъединиц (гомо-олигомер) или (как К+-канал) различными субъединицами ЦНЗ- тетрамера (гетеро-олигомер), пока неизвестно.
См. Канал кальциевый, чувствительный к циклическим нуклеотидам
Рецепция обонятельного сигнала: биофизика ЦНЗ каналов
Смотрите также:
