Геликаза-зависимая изотермическая амплификация (ГЗА, HDA)
Геликаза-зависимая изотермическая амплификация, ГЗА (helicasedependent isothermal amplification, HDA) [греч. helix (helikos) — спираль; греч. iso — равный и therme — тепло; лат. amplificatio — распространение, увеличение] — метод амплификации ДНК in vitro (см. Амплификация (1)), который моделирует механизм репликации ДНК in vivo. Первоначально цепи ДНК разделяют с помощью ДНК-геликазы (см. ДНК-геликаза, расплетающий белок), затем разделенные цепи покрывают белком, связывающимся с одноцепочечными ДНК (SSB), и после гибридизации со специфическими праймерами (см. Праймер (1)), отжигающимися по концам нуклеотидной последовательности-мишени, осуществляют синтез новых цепей ДНК с использованием ДНК-полимеразы. Образующиеся двухцепочечные молекулы вновь расплетаются геликазой и т. д. Такая цепная реакции, протекающая при постоянной температуре, ведет в конечном итоге к экспоненциальной амплификации мишени. Метод Г.-з.и.а. предложен в 2004 г. M. Винсентом, Я. Ксу и Х. Конгом.
Смотрите также:
