Гель-электрофорез в пульсирующем поле (PFGE)
Гель-электрофорез в пульсирующем поле (pulsed field gel eletrophoresis, PFGE) [лат. gel(are) — застывать, греч. elektron — смола, янтарь и phoresis — несение, перенесение; лат. pulsus — удар, толчок] — вариант метода электорофоретического разделения крупных (до 10 млн. п.н.) фрагментов ДНК, при котором с помощью специального оборудования в электрофоретической камере чередуются импульсы электрического поля, имеющие разное направление. Существуют различные варианты метода, гл. обр. связанные с геометрическим расположением направлений полей (ортогональный, гексогональный, инверсионный). Эффективность разделения фрагментов ДНК зависит не только от их размеров, но и от условий проведения электрофореза (напряжение, температура буфера, концентрация агарозы, время одного импульса). В качестве маркеров для определения величины больших молекул ДНК обычно используют целые хромосомы дрожжей с известной молекулярной массой. Традиционно применяется для картирования генов и в молекулярной эпидемиологии. Метод предложен Д. Шварцем и Ч. Кантором в 1984 г.
Смотрите также:
