Методы Грюнштейна-Хогнесса (гибридизация колоний)
Гибридизация колоний, метод Грюнштейна-Хогнесса (colony hybridization, Grunstein-Hogness method) [лат. hybrida — помесь; лат. colonia — поселение; греч. methodos — способ познания; от имен М. Грюнштейна и Д. Хогнесса] — метод выявления определенного фрагмента генома в библиотеке генов, клонированных в бактериях. Колонии анализируемых бактерий, содержащих рекомбинантные ДНК, выращивают на чашке Петри, затем перепечатывают на фильтр. После денатурации ДНК лизированных на фильтре колоний их гибридизуют на фильтре с радиоактивным зондом, соответствующим искомой нуклеотидной последовательности ДНК. Образование гибрида детектируется с помощью авторадиографии (они могут быть выделены путем совмещения авторадиограммы с колониями живых бактерий исходной чашки Петри).
Метод предложен М. Грюнштейном и Д. Хогнессом в 1975 г.
Смотрите также:
