Дрожжевая искусственная хромосома (yeast artificial chromosome, YAC)
Дрожжевая искусственная хромосома (yeast artificial chromosome, YAC) [греч. chroma — цвет, окраска и soma — тело] — кольцевая рекомбинантная молекула ДНК, содержащая отдельные генетические элементы дрожжевого генома, которые позволяют ей существовать во внехромосомном состоянии в клетках дрожжей. Д.и.х. заключает в себе две теломерные нуклеотидные последовательности (TEL), необходимые для репликации концов мини-хромосомы, и область начала репликации (ARS), соединенную с последовательностью центромеры (CEN). Эти функциональные элементы требуются для репликации Д.и.х. и ее правильной передачи в дочерние ядра во время митоза (см. Митоз). Кроме того, Д.и.х. содержит два селектирумых маркера: а) восстанавливающий способность к росту ауксотрофных по триптофану клеток дрожжей в отсутствие экзогенного триптофана и б) компенсирующий генетический дефект клеток дрожжей, который нарушает биосинтез урацила. В этом векторе имеется также ген супрессорной тРНК sup4, являющийся селектируемым маркером для поддержания вектора в мутантных бактериальных клетках, содержащих амбер-мутации в жизненно важных генах. Помимо этого, он обладает последовательностями нуклеотидов, необходимыми для его репликации в бактериальных клетках. Д.и.х. широко используется в качестве векторов для клонирования крупных фрагментов ДНК (от 100 до 500 и более тыс. п.н.). Первая Д.и.х. создана в 1983 г. А. Мюрреем и Дж. Шостаком.
Смотрите также:
