Наращивание «хвоста» (tailing)
Наращивание «хвоста» (tailing) — искусственное присоединение к 3'-ОН-концам обеих цепей фрагмента ДНК с тупыми концами (чаще всего — кДНК) «хвоста» («tail») в виде гомополимера из дезоксирибонуклеозидмонофосфатов с помощью терминальной трансферазы (см. Терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза, концевая дезоксинуклеотидилтрансфераза); в случае создания комплементарных «хвостов» у фрагмента ДНК и вектора (напр., нуклеотидных последовательностей поли(дА) во фрагменте кДНК и поли(Т) в векторе) такой фрагмент ДНК легко лигируется с вектором и может быть клонирован в составе вновь формирующейся рекомбинантной плазмиды. Метод предложен Р. Хигуши с соавт. в 1976 г.
Смотрите также:
