Сайт-специфический мутагенез, сайт-направленный мутагенез (site-specific mutagenesis, site-directed mutagenesis)
Сайт-специфический мутагенез, сайт-направленный мутагенез (site-specific mutagenesis, site-directed mutagenesis) [англ. site — участок, местоположение; лат. specificus — видоопределяющий, видовой; лат. mutatio — изменение и греч. genesis — происхождение, развитие] — метод внесения in vitro мутации в конкретный участок клонированной нуклеотидной последовательности ДНК с помощью мутантных олигонуклеотидов. Первоначально мутагенизируемую нуклеотидную последовательность переводят в одноцепочечную форму (напр., в составе вектора на основе ДНК фага М13) и синтезируют комплементарную ей цепь, используя в качестве затравки для ДНК-полимеразы олигонуклеотид, содержащий требуемую мутацию; после трансформации бактериальных клеток образовавшимся гетеродуплексом и первого раунда репликации образуются мутантная и нормальная формы ДНК, которые затем разделяют биохимическими методами. Метод С.-с.м. был разработан М. Смитом в 1978 г. (Нобелевская премия за 1993 г.).
Смотрите также:
