Сауз-Вестерн блоттинг (SouthWestern blotting)
Сауз-Вестерн блоттинг (SouthWestern blotting) [англ. south-western — юго-западный; англ. blotting — промокание, получение реплики пятен] — метод быстрой идентификации белка, связанного с ДНК, используемый для определения ДНК-белковых взаимодействий. Первоначально белки разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле и иммобилизуют на нитроцеллюлозной мембране в нативной конфигурации. Затем рестрикционные фрагменты ДНК-мишени метят и гибридизуют с иммобилизованными белками в присутствии неспецифической конкурентной ДНК. Связывающийся с определенным белком фрагмент ДНК выявляют с помощью радиоавтографии, далее он может быть элюирован из каждого индивидуального ДНК-белкового комплекса и затем секвенирован (см. Секвенирование). Метод предложен Дж. Лелонтом с соавт. в 1989 г.
Смотрите также:
