Теломераза Tetrahymena: гены белковых компонентов
Виду необходимости формирования большого количества теломер de novo в процессе развития макронуклеусов, ресничные инфузории содержат относительно большое количество теломеразы и являются хорошим объектом для биохимических исследований. Действительно, Блэкберн и Грейдер впервые идентифицировали и охарактеризовали теломеразную активность, используя макронуклеусы Tetrahymena [ Greider, ea 1985 ]. В 1995 г. Грейдер с ее коллегами удалось выделить теломеразу Teirahymena в большом количестве и определить аминокислотные последовательности пептидов, образовавшихся, по их предположению, из фермента [ Harrington, ea 1995 , Collibs, ea 1995 ]. Были клонированы два гена Teirahymena, а именно р80 и р95 ; каждый из этих генов кодирует белок с соответствующей молекулярной массой, что отражено в названии генов [ Collibs, ea 1995 ]. Было показано, что белок р80 связывается с матричной РНК Teirahymena, в то время как белок р95 связывается с теломерными праймерами, которые используются в качестве субстратов в реакциях элонгации. Более того, предполагаемые аминокислотные последовательности р95 обладали слабовыраженной гомологией с консервативными мотивами, обнаруженными в ДНК- и РНК- полимеразах. Исходя из этого, было высказано предположение, что белки р80 и р95 могут являться регуляторными и каталитическими компонентами теломеразы Teterahymena соответственно. Чтобы убедиться в том, что эти белки входят в состав теломеразы, необходимо было провести реконструктивный эксперимент и продемонстрировать, что из смеси очищенных рекомбинантных белковых компонентов образуется активный фермент. Успешные эксперименты с использованием рекомбинантных белков р80 и р95, а также транскрибированной in vitro матричной РНК Teirahymena до сих пор не были описаны. Таким образом, в настоящее время неизвестно, являются ли р80 и р95 незаменимыми теломеразными белками, или они всего лишь образуют комплекс с теломеразой Teirahymena.
Смотрите также:
