SAR/MAR-элементы: исследование функций с помощью трансгеноза
SAR/MAR-элементы это участки ДНК, которые присоединяются к ядерному матриксу и которые возможно и прикрепляют к нему хроматиновые петли.
Вот как исследовали их функции:
1. Энхансер и промотор гена лизоцима присоединили in vitro к репортерному гену хлорамфениколацетилтрансферазы (chloramphenicol acetyl-transferase, САТ ).
2. Трансформировали клетки, и наблюдали выраженный эффект энхансера гена лизоцима на экспрессию САТ.
3. Создали новую конструкцию, в которой поместили in vitro между энхансером и промотором SAR . Ввели эту конструкцию в клетки и увидели что эффект энхансера исчезает. Видимо SAR изолировал ген от действия энхансера.
4. Поместили эти SAR элементы по краям конструкции, содержащей только промотор и ген, и увидели, что они усиливают экспрессию, в какое бы место генома конструция не внедрилась. Это происходит, видимо, вследствие изоляции гена от супрессии окружающим хроматином.
Смотрите также:
