Рис. 7 трг
Разрушение hprt гена путем замещения (А) или внедрения (В). В обоих случаях вектора содержат последовательности гена hprt содержащие экзоны 6, 7 и 9 которые обозначены вертикальнами черточками с соответствующими номерами. Экзон 8 замещен батериальным геном устойчивости к неомицину neo. В случае замещения происходит двойная рекомбинация между гомологичными последоваетльностями вектора и генома в результате чего фрагмент гена hprt замещается и внутри него оказывается последоавательность гена neo. Линейный вектор внедрения сконструирован таким образом, что если представить его в циклической форме как это сделано на рисунке, то его концевые последовательности окажутся колинеарными с соответствующей последовательностью генома. В этом легко убедиться проследив за нумерацией экзонов. Рекомбинация в этом случае происходит по последовательностям в близким к разорванной части вектора и он внедряется в гееном. Способ внедрения можно проследить по линиям образующим букву Х на рисунке. Оно происходит между экзонами 6 и 7. Последовательности близлежащие к экзону 6 в геноме соединяются с последовательностями вектора как это указывает линия ведущая от этого экзона кправому концу вектора. В свою очередь последовательности прилежащие к экзону 7 в геноме соединяются с последовательностями прилежащими к экзону 6 в векторе. В результате епроисходит внедрение вектора в геном. Он приносит с собой ген neo и прилежащие к нему геномные последовательности. В результате та часть геномных последовательностецй которые присутствовали в векторе после его внедрения оказываются удвоенными в геноме [ Capecchi, 1989 ].
Ссылки на рисунок:
