Визуализация нуклеиновых кислот и комплексов нуклеиновых кислот с белками
Белок цитохром С обладает сродством к нуклеиновым кислотам, образуя вокруг тяжа нуклеиновой кислоты белковую "рубашку". Если такой комплекс нанести на поверхность воды, то благодаря сильной гидрофобности цитохрома С на поверхности образуется тонкая мономолекулярная пленка, в которой распределены в удобном для наблюдения виде нуклеиновые кислоты. Перенос такой пленки на ЭМ-пленку-подложку и последующее круговое оттенение под углом 7* сплавом платины с палладием (1:4) дает оптимальный препарат для изучения нуклеиновой кислоты. Условия распыления (глубина вакуума, качество эжектора), а также качество цитохрома С и раствора нуклеиновой кислоты обусловливают качество изображения нуклеиновой кислоты. Для наблюдения однонитевых ДНК и РНК в наслаиваемый на воду раствор нуклеиновой кислоты вместе с цитохромом добавляют формамид, функции которого заключаются в "расправлении" однонитевых нуклеиновых кислот на поверхности воды.
Смотрите также:
