Маркировка антигенов на ультраструктурном уровне
Обработка и подготовка биологического материала при отрицательных температурах для исследования в ПЭМ позволяет наилучшим образом сохранить не только структуру объекта, но и его антигенные свойства. Последнее обстоятельство очень важно при проведении иммуноцитохимических реакций и маркировке различных антигенов. Для этой цели были разработаны среды, полимеризутощиеся при низких температурах (до -50*С) при непрямом УФ-облучении. При этом применяют только альдегидную фиксацию, т.к. OsО4 препятствует проникновению ультрафиолета внутрь образца. Дегидратацию осуществляют по стандартной схеме. Наиболее популярные среды этого типа Ловикрил и LR Wihte. Интересующие антигены маркируют непосредственно на ультратонких срезах. Как правило, в качестве маркера применяют конъюгаты коллоидного золота различного диаметра (5-20 нм) с антивидовыми иммуноглобулинами.
Смотрите также:
