Полиформизм длин рестриктных фрагментов (ПДРФ) для выявления мутаций
Использование косвенных подходов оказалось возможным благодаря существованию в геноме полиморфных локусов ДНК. Нуклеотидные замены достаточно часто встречаются в некодирующих участках ДНК. Значительное число нуклеотидных замен приводит к изменению картины рестрикции. Эти изменения можно выявить с помощью блотгибридизации по Саузерну, поскольку изменяется длина рестриктных фрагментов. Эта разновидность полиморфизма ДНК получила название полиформизма по длине рестриктных фрагментов (ПДРФ). ДНК расщепляют эндонуклеазами (рестриктазами), распознающими нормальные или измененные последовательности, и по размеру образовавшихся фрагментов ДНК определяют, какую из последовательностей содержит исследуемая ДНК. Расположенный вблизи изучаемого гена или внутри него полиморфный сайт может служить маркером аллельных вариантов этого гена, в том числе маркером патологических мутаций.
Смотрите также:
