Dnmt1 (Поддерживающая ДНК-метилтрансфераза млекопитающих)
Прогресс в понимании любого биологического процесса на молекулярном уровне зависит от выделения ключевых игроков. Активность ДНК-метилтрансферазы была довольно рано обнаружена в грубых клеточных экстрактах, но в конечном счете ее удалось очистить как белок с массой, 200 кД ( Bestor and Ingram, 1983 ). Фермент Dnmt1 специфичен для CpG и обладает значительной активностью против неметилированной ДНК. Однако предпочтительным ДНК-субстратом для него является ДНК, метилированная по CpG только на одной нити (так называемая полуметилированная ДНК). В силу этого свойства казалось возможным, что это поддерживающая ДНК- метилтрансфераза. Последующие исследования существенно подкрепили этот взгляд, поскольку инактивация Dnmt1 в эмбриональных стволовых клетках мыши ( табл. 18.1 ) ведет к утрате метилирования CpG по всему геному ( Li et al., 1992 ). Имеющиеся данные согласуются с точкой зрения, согласно которой Dnmt1 поддерживает метилирование ДНК по CpG, завершая метилирование полуметилированных сайтов, как постулировал и Риггс с Холлидеем и Пью ( рис. 18.2 ) ( Holliday and Pugh, 1975 ; Riggs, 1975 ).
Точная динамика модификаций гистонов у мышей пока не описана, однако метилирование ДНК постепенно уменьшается с каждым клеточным делением до стадии 16-клеточной морулы . Причина заключатся в том, что Dnmt1, метилтрансфераза, которая полуконсервативно поддерживает метилирование CpG динуклеотидов во время репликации ДНК, исключается из ядра ( Carlson et al., 1992 ).
Смотрите также:
