Аллель-специфический анализ с использованием рестриктаз
Аллель-специфический анализ с использованием рестриктаз применяют, когда исследуемая мутация изменяет сайт рестрикции. Принцип метода совпадает с методом ПДРФ .
Рестриктаза может расщеплять двухцепочечную ДНК только в том случае, если ДНК содержит соответствующий сайт рестрикции. Наличие или отсутствие сайта рестрикции в продукте ПЦР указывает на особенности первичной структуры амплифицируемого участка ДНК: наличие или отсутствие мутации, изменяющей последовательность нуклеотидов этого участка. В результате мутаций могут не только элиминироваться известные сайты рестрикций, но и возникать новые, что выявляется по изменению электрофоретической подвижности продуктов ПЦР после их инкубации с рестриктазами.
Смотрите также:
