Рис 2.13 пат Плазмиды для эуспессии LIF


Кассеты генов в экспрессирующих векторах, использованные для получения фактора, ингибирующего лейкозы, в культурах клеток

а - кДНК huLIF (черные стрелки), включающая лидерные последовательности (незаштрихованные прямоугольники), была интегрирована в экспрессирующий вектор pXMT3 под контроль гибридного промотора, расположенного между точкой начала репликации вируса SV40 и основным поздним промотором аденовируса (SV40/AdMLP), ДГФР, amp, neo - гены дигидрофолатредуктазы и устойчивости к ампициллину и неомицину соответственно, VA - трансляционный энхансер; pA - сайт полиаденилирования;

б - вектор pSV2neo-Ig-huLIF, сконструированный на основе транскрипционных и трансляционных регуляторных элементов генов тяжелой (IgH) и легкой (IgL) цепей иммуноглобулинов. Транскрипция кассеты контролируется мышиным промотором гена IgL ? и энхансером гена IgH. Транскрипт, содержащий последовательность huLIF, в результате сплайсинга объединяется с экзоном 2 гена IgL, кодирующего лидерную последовательность, которая обеспечивает секрецию зрелого huLIF клетками;

в - вектор pGES-LIF, прямоугольники 1-4 - регуляторная область кластера глобиновых генов, короткая черная стрелка - промотор ?-глобинового гена, ломаной линией отмечены последовательности, удаляемые сплайсингом. Во всех случаях стрелки указывают направление транскрипции

Ссылки на рисунок:

  • CH0 клетки яичников китайских хомячков (линия CHO)
  • Клетки африканской зеленой мартышки (линия COS)
  • Клетки селезенки мышей (линия MEL)
  • Клетки мышиной миеломы (линия Sp2/0)
  • Системы экспрессии рекомбинантных генов: эффективность