ИЛ-2 ген: регуляция транскрипции: 5'-нетранслируемая область: введение
За исключением некоторых трансформированных линий, мРНК IL-2 обнаруживается в Т-клетках только после их индукции соответствующими сигналами, т.е. экспрессия IL-2 регулируется на уровне транскрипции [ Efrat S., Koempfer R.,1984 ].
Анализ последовательностей генов IL-2 человека и мыши показал необычайно высокую консервативность 5'-фланкирующей области [ Holbrook N.J., ea, 1984 ]. Кроме того, в 5'-концевой области гена IL-2 было выявлено несколько участков гомологии с генами других лимфокинов ( INF , GM-GSF ) и IL-2R [ Durand,D.B., M.R.Bush, ea, 1987 ].
Другие косвенные подтверждения важнейшей роли 5'-фланкирующей последовательности в регуляции транскрипции гена IL-2 были получены при изучении структуры гена с помощью ДНКазы I. В Т-клеточных линиях было выявлено три участка гиперчувствительности к ДНКазе I , одна из которых расположена в первом интроне, две другие - в 5'-фланкирующей области гена IL-2 . После индукции в промоторной области гена IL-2 около положения -85 (относительно начала транскрипции) возникал дополнительный сайт гиперчувствительности к ДНКазе I. Появление дополнительного сайта свидетельствует об изменении структуры хроматина гена IL-2 в процессе активации клеток. В других гематопоэтических клеточных линиях ген IL-2 имел аналогичную структуру хроматина, однако, индукция этих линий не приводила к появлению дополни-тельного сайта чувствительности. В негематопоэтических клетках сайты чувствительности к ДНКазе I в гене IL-2 отсутствовали. Это позволяет предположить, что структура хроматина промоторной области гена IL-2 зависит от типа клеток и изменяется в процессе активации гена [ Siebenlist,U., D.B.Durand, ea, 1986 ].
Для идентификации регуляторных элементов 5'-фланкирующей области некоторые последовательности гена IL-2 присоединяли к структурному гену хлорамфениколацетилтрансферазы ( CAT ). Полученные конструкции трансфицировали в Т-клетки или не Т-клеточные линии и измеряли экспрессию САТ гена до и после активации. Было установлено, что область от -81 до +51 служит промотором для гетерологичного гена в не Т-клеточной системе (т.е. его действие не ограничивается Т-клетками) [ Fujita,T., H.Shibuya, ea, 1986 ].
Смотрите также:
