Апоптоз: маркеры
Морфологическими маркерами апоптоза являются апоптозные тельца и сморщенные нейроны с целостной мембраной.
Биохимическим маркером, который стал практически идентичен понятию "апоптоз", считают ДНК-фрагментацию [ Kihara S., Shiraishi Т. 1994 , MacManus J.P., Linnik M.D. 1997 , Nitatori Т., Sato N. 1995 , Tobita M., Nagano I. 1995 ]. Этот процесс активируется ионами Ca2+ и Mg2+ , а ингибируется ионами Zn2+ . Расщепление ДНК происходит в результате действия кальций-магний- зависимой эндонуклеазы. Показано, что эндонуклеазы расщепляют ДНК между белками гистонами , высвобождая фрагменты регулярной длины [ Wyllie A.H. 1980 , Waters C. 1997 ]. ДНК первоначально делится на большие фрагменты из 50 и 300 тыс. оснований, которые затем расщепляются на составные части из 180 пар оснований, образующие характерную "лестницу" при сепарации гелевым электрофорезом [ MacManus J.P., Linnik M.D. 1997 , Nitatori Т., Sato N. 1995 ]. Однако ДНК-фрагментация не всегда коррелирует с характерной для апоптоза морфологией и является условным маркером, неэквивалентным морфологическим критериям [ Tomei L.D., Shapiro J.P. 1993 , Hockenbery D.M. 1995 ]. Наиболее совершенным для подтверждения апоптоза является биологически- гистохимический метод, позволяющий не только зафиксировать факт ДНК- фрагментации, но и наличие важного морфологического признака - апоптозных телец [ Gavrieli Y., Sherman Y. 1992 ].
Смотрите также:
