Микоплазмы: методы выявления: с 6-МПДР
В середине 80-х годов был предложен метод, основанный на действии фермента микоплазм - аденозинфосфорилазы. Активность этого фермента в клетках млекопитающих незначительна. Нетоксичный для клеток млекопитающих аналог природных пуринов (6-МПДР) в присутствии микоплазм образует два антиметаболита: 6-метилпурин (6-МП) и 6-метилрибозид (6- МР). Эти антиметаболиты настолько токсичны, что культивируемые клетки отслаиваются и погибают. Таким образом, гибель, или "цитотоксический эффект", наблюдаемый невооруженным глазом во флаконе с культивируемыми клетками через 3-7 сут после добавления 6-МПДР, служит косвенным указанием на зараженность тестируемой линии клеток микоплазмами ( Jurmanova et al., 1986 ; McGarrity et al., 1986 ). В связи с этим фирма "Gibco" (США) выпустила набор (Mycotest) для выявления микоплазм, основной частью которого является препарат 6-МПДР.
К сожалению, на практике было установлено, что активность аденозинфосфорилазы разных микоплазм неодинакова, чувствительность разных клеточных культур к действию антиметаболитов также различается, поэтому метод оказался не универсальным.
Смотрите также:
