GAP/ras Белки
Cуществование белкового фактора, повышающего GTPазную активность р21ras было предсказано на основе анализа двух онкогенных мутантов ras- белка : Gly12-->Val и Gly12-->Asp, а затем доказано экспериментально в 1987 г. ( Trahey M. and McCormick F., 1987 ). Было показано, что мутанты Val12 и Asp12 в силу измененной конформации белка не подвержены влиянию GAPа in vivo и, следовательно, гораздо (в 300 раз) медленнее гидролизуя GTP, дольше находятся в активном состоянии. Это обуславливает злокачественную трансформацию клеток .
GAP является цитоплазматическим белком с Mr=120kDa (1044 аминокислотных остатка). Он экспрессируется практически во всех клетках млекопитающих ( Hall A., 1992 ). C-концевая область белка длиной около 250 аминокислотных остатков является каталитическим доменом GAP . N-конец содержит два домена SH2 и один домен SH3 ( рис. 7 ). SH2-области обеспечивают связывание GAPа с активированными рецепторами факторов роста ( Anderson D. ea, 1990 ; Ellis C. ea, 1990 ). SH3-домен, по-видимому, играет роль в передаче сигнала "вниз" (р21ras --> GAP --> эффектор GAPа; стрелки означают путь передачи сигнала; Duchesne M. ea, 1993 ).
Аналогичным действием на ras белки обладает белок NF1 . Помимо повышения GTPазной активности ras, GAP по-видимому является также эффектором ras белка .
Активность GAP регулируется. Показано, что активация протеинкиназы C , имеющая место при стимуляции деления Т-лимфоцитов, понижает активность GAP ( Downward J. ea, 1990 ). Следствием уменьшения GAP-активности является снижение скорости гидролиза GTP до GDP и присутствие в клетках преимущественно GTP-связанной формы p21, активно проводяшей митогенные сигналы.
С другой стороны показано, что активность GAP может значительно повышаться при увеличении плотности посева клеток, обладающих контактным ингибированием ( Hoshino M. ea, 1988 ). В результате этого активируется GTPазная активность Ras, что приводит к преимущественному содержанию GDP-связанной "неактивной" формы белка.
Смотрите также:
.gif)