Таб. spl Хроматографически выявляемые факторы сплайсинга
*****************************************************************************
Фактор Хроматографические свойства Другие свойства ***************************************************************************** Стадия 1. разрезание 5' сайта сплайсинга и формирование лариата
1B DEAE; 0,2M FT 55/10' S
Biorex; Appl. 50mM Step
II DEAE; Appl. 0.2M, 1M Step MN(s)
NEM(s)
65/30' S
SF1 Spermine Agarose; Appl.0.09M, MN(s)
0.3M Step
SF2 Spermine Agarose; Appl.0.09M, MN(s)
0.3M Step NE но без S100
SF4B Spermine Agarose; Appl.0.06M,
0.5M Step; 0.09M FT; CM Sephadex NE и S100
SF2' DEAE; Gradient elution at 0.2-0.26M MN(r)
Mono Q; Gradient elution at 0.16M NEM(s)
Heparin-Sepharose; 20mM FT 46/15'R
AS ppt
MW;50.000(Gly gra)
NE и S100
(см. далее) Стадия 2. разрезание 3' сайта сплайсинга и сшивание экзонов
1A DEAE; 0,2M FT
Biorex; 50mM FT
SF3 Spermine Agarose; Appl.0.09M, 45/10' R
0.3M Step NE и S100
SF4A Spermine Agarose; 0.09M FT,
0.06M FT; CM Sephadex NE и S100 ******************************************************************************** Обозначения факторов сплайсинга даны в соответствии с оригинальными публикациями ( Furneaux et.al, Perkins et al, Krainer & Maniatis , Kramer & Keller ). Сокращения: MN, micrococcal nuclease; s-sensitive; r-resistant; NEM, N-ethylmaleimide; NE, nuclear extract; S100, cytoplasmic S100 extract; FT, flow-through fraction; GLY gra, glycerol gradient.Смотрите также:
