Агробактериальная трансформация, агробактериальный перенос генов
Агробактериальная трансформация, агробактериальный перенос генов (agrobacterial transformation, agrobacterium-mediated gene transfer) [греч. agros — поле и bacterion — палочка; лат. transformatio — превращение] — перенос чужеродных генов (ДНК) в реципиентный геном растений с помощью Agrobacterium tumefaciens или A. rhizogenes и их Ti-плазмид или Ri-плазмид, соответственно. Первоначально целевой ген клонируют в подходящем векторе, который содержит нуклеотидные последовательности Т-ДНК из Ti-плазмиды. Такая конструкция трансформируется в подходящий штамм E. coli, размножается и переносится в клетки агробактерий, содержащие Ti-плазмиду дикого типа или бинарную векторную плазмиду с генами вирулентности (vir-генами). С помощью рекомбинации целевой ген из векторной плазмиды переносится на Ti-плазмиду дикого типа или бинарную векторную плазмиду. При инкубации генетически модифицированных агробактерий с протопластами, листовыми дисками или другими частями растения vir-область Ti(Ri)-плазмиды активируется веществами, выделяемыми поврежденными клетками растения (напр., ацетосирингоном). В результате T-район, содержащий целевой ген, вырезается из рекомбинантной плазмиды и внедряется в геном растительной клетки.
Агробактериальная трансформация является одним из способов получения трансгенных двудольных растений (см. Трансгенное растение).
Смотрите также:
