Прямой метод флюоресценции антител
На фиксированные антигенсодержащие препараты наносят рабочее разведение содержащей специфические антитела гамма-глобулиновой фракции сыворотки, меченной флюоресцирующим красителем (как правило, флюоресцеин-изотиционатом). Для снижения неспецифического свечения фона в состав этого конъюгата рекомендуется включать в равной пропорции рабочее разведение бычьего альбумина, меченного фторидом сульфародамина В. Конъюгат равномерно распределяют по всей поверхности препарата, избегая образования пузырьков воздуха. Стекла помещают во влажную камеру с температурой 37*С на 30 мин. Затем препараты тщательно отмывают проточной водой (около 10 мин) ополаскивают в 2-3 порциях дистиллированной воды, высушивают на воздухе при комнатной температуре и просматривают в люминесцентном микроскопе. Специфическая реакция в виде свечения (диффузного или гранулярного характера) обнаруживается в том участке препарата, где произошла реакция антиген-антитело. Прямой метод флюоресценции используется, в основном, при индикации и идентификации специфических вирусных антигенов.
Смотрите также:
