ген и мРНК пролактина крысы
Впервые нуклеотидная последовательность гена, кодирующего мРНК пролактина, была установлена для крысы ( Cooke N.E. ea, 1982 ; Gubbins E.J. ea,1980 ; Maurer R.A. ea, 1981 ). Ген пролактина крысы размером около 10500 п.о. состоит из пяти экзонов 1-5 и четырех интронов A-D. Ген кодирует прогормон размером 226 а.к. остатков, из которых 29 представляют собой сигнальный пептид и 197 а.к. остатков - пролактин. Интроны A,B,C и D прерывают нуклеотидную последовательность гена крысы между кодонами -21/- 20, 38/39, 74/75 и 134/135 аминокислотных остатков препролактина, соответственно ( Cooke N.E. ea, 1982 ; Gubbins E.J. ea,1980 ; Maurer R.A. ea, 1981 ). Сайт старта транскрипции, или сайт кэпирования, определенный экспериментально с помощью картирования S1 нуклеазой, находится в 54 нуклеотидах от инициирующего ATG кодона метионина ( Gubbins E.J. ea,1980 ; Maurer R.A. ea, 1981 ). Вероятный TATA-бокс (5'-TATAAA-3') располагается в районе -27/-22 от сайта кэпирования ( Cooke N.E. ea, 1982 ; Maurer R.A. ea, 1981 ). Cooke N.E. и соавторы ( Cooke N.E. ea, 1982 ) указывают на отсутствие в непосредственной близости от последовательности TATAAA последовательности CAAT-бокса, также необходимой для точной и эффективной транскрипции эукариотических генов ( Muller M.M. ea, 1988 ; Rosenthal N., 1987 ). Однако они отмечают, что в 112 нуклеотидах ( Cooke N.E. ea, 1982 ) (- 144/-139 [88]) с 5'-конца от TATA-бокса находится, вероятно, неактивная промоторная последовательность 5'-AATAAA-3', как видно, гомологичная TATA- боксу. А в в 42 нуклеотидах перед 5'-AATAAA-3' последовательность 5'- CAAAT-3' ( Maurer R.A. ea, 1981 ). Однако такое слишком "удаленное" от сайта инициации транскрипции расположение TATA- и CAAT-боксов представляется маловероятным. Обращают на себя внимание как все же явные отличия окружения этого участка 5'-AAT-CAAAT-CC-3'( Cooke N.E. ea, 1982 ) от консенсуса 5'-GG(C/T)CAATCT-3' CAAT-бокса ( Drouin J. ea, 1985 ), так и полученные ранее другими авторами данные о структуре этого района 5'- AATCAAAATCC-3' ( Maurer R.A. ea, 1981 ), где между C и T четыре A, а не три, что еще больше уменьшает степень гомологии с консенсусом. С другой стороны, вблизи перед TATA-боксом -27/-22 в области -62/-45 была обнаружена последовательность, которая может быть вовлечена в регуляцию транскрипции гена пролактина крысы - палиндром 5'-TGATTATAT-ATATATTCA-3' ( Maurer R.A. ea, 1981 ). В этом контексте интересно отметить, что гипофиз специфичный фактор Pit-1 фактор, который активирует ген пролактина, также имеет AT-богатые последовательности узнавания ( Karin M., 1989 ). Для гена пролактина человека было показано, что как раз 3'-половина этого палиндрома и еще несколько 3'-нуклеотидов -ATATATTCA-TGAAG-3' идентичны у генов пролактина крысы, быка и человека и являются сайтом связывания для гипофиз специфичного фактора Pit-1 (консенсус 5'-A/TA/TTATNCAT-3') ( Peers B. ea, 1991 ). Кроме того, возможно, что такая AT-богатая последовательность может выполнять функцию TATA-бокс подобного элемента для абберантной транскрипции гена пролактина в некоторых опухолях , подобно гену ПОМК ( Kraus J. ea, 1993 ).
Секвенированные кДНК пролактина крысы ( Cooke N.E. ea, 1980 ; Gubbins E.J. ea, 1979 ) (самая длинная - 823 п.о.) почти полностью перекрывают нуклеотидную последовательность мРНК, кодируемую геном пролактина, не считая трех 5' нуклеотидов экзона 1 и небольшой части 3'-нетранслируемой области ( Gubbins E.J. ea, 1979 ). Несколько отличий между последовательностями кДНК находятся в третьем положении кодона и не меняют аминокислотный остаток пролактина. Только одно отличие во втором положении кодона приводит к замене Asp-98 на Thr-98, которые являются аналогами, и, следовательно, не приводит к изменению вторичной или третичной структуры или функции пролактина ( Cooke N.E. ea, 1980 ).
Смотрите также:
