CREB Белки (CRE-связывающие белки)
Ответ гена c-fos на агенты, повышающие уровень cAMP в клетке, опосредуется в основном элементами CRE в промоторной области гена. С элементом CRE в позиции -64/-57 связываются CRE-связывающие белки CREB.
CREB-белки кодируются как минимум десятью различными генами, и это семейство включает помимо CREB так называемые активирующие транскрипционные факторы ( ATF ) [ Foulkes N.S. ea, 1994 ].
CREB-Белки, подобно Fos- и Jun- белкам, имеют мотив "лейциновой молнии" ( ZIP ), необходимый для димеризации [ Abel T. and Maniatis T., 1989 ], и связываются с CRE в димерной форме [ Foulkes N.S. ea, 1994 ]. Примечательно, что они могут также димеризоваться с белком c-Jun. Jun/CREB гетеродимер обладает большим сродством к CRE, чем к TRE [ Macgregor P.F. ea, 1990 ].
Белок CREB содержит домен, названный KID ("kinase-inducible domain") или Р-бокс, необходимый для его РКА- зависимой активации, в котором расположен Ser-133 - сайт для фосфорилирования PKA [ Lalli E. and Sassone-Corsi P., 1994 , Brindle P. ea, 1994 ].
Существуют несколько членов семейства CRE-связывающих белков, ингибирующих транскрипцию и названных "CRE- модуляторами"( CREM ).
Наименьшие размеры среди всех CRE-связывающих белков имеет cAMP- индуцибельный ранний репрессор ( ICER ), содержащий только домены ДНК- связывания и димеризации и также определяющий подавление транскрипции [ Lalli E. and Sassone-Corsi P., 1994 , Molina C.A. ea, 1993 ].
CREB , белки могут фосфорилироваться и PKC.
PKC может фосфорилировать CREB по Ser-133, а также аналогичный сайт в CREM-тау [Lalli E. and Sassone-Corsi P., 1994]. РКС может фосфорилировать также и другие CRE-связывающие факторы, в частности, CRE-BP1 [ Sakurai A. ea, 1991 ]. Таким образом, возможно, РКС может участвовать в регуляции активности гена c-fos, фосфорилируя CRE-связывающие трансактиваторы, хотя необходимо отметить, что данная регуляция в физиологических условиях не показана.
Однако, существует большое количество акцепторов кальция помимо РКС, в частности, кальмодулин , регулирующий протеинкиназы, относящиеся к семейству кальмодулинзависимых протеинкиназ ( СаМК ) [ Pietrobon D. ea, 1990 ].
Показано, что деполяризация клеток РС-12 приводит к повышению активности CREB, и СаМК фосфорилируют этот транскрипционный фактор по Ser- 133 in vitro [Sheng M. ea, 1991].
Однако изоформа СаМКII, по-видимому, не играет большой роли в стимуляции CREB, поскольку эта изоформа не обнаруживается в клеточном ядре и, кроме того, фосфорилирует CREB также и по Ser-142, что блокирует его активацию. В то же время СаМКIV , способная мигрировать в ядро, фосфорилирует CREB только по Ser-133, способствуя повышению его активности [ Matthews R.P. ea, 1994 , Sun P. ea, 1994 ].
Кроме РКА и СаМК обнаружена протеинкиназа , которая фосфорилирует CREB по Ser-133 в ответ на NGF и EGF в клетках РС-12 . Эта протеинкиназа в отличие от перечисленных не является непосредственным эффектором вторичных мессенджеров . Она функционирует как компонент Ras-зависимого пути передачи сигнала и отлична также и от RSK и pp70(S6K) [ Ginty D.D. ea, 1994 ].
Таким образом, cAMP-чувствительные элементы в РС-12 клетках могут контролироваться без участия РКА и СаМК.
Смотрите также:
