Антионкогены активируют транскрипцию генов, контролирующих пролиферацию
р53 , как" нарушитель правил" , осуществляет свою функцию двумя путями: непосредственно супрессируя экспрессию генов, контролирующих пролиферацию, а также опосредованно, активируя экспрессию генов, которые, по-видимому, способны негативно влиять на размножение клеток.
Наличие элемента в промоторе, ответственного за специфическое связывание с р53 , превращает р53 из репрессора в активатор транскрипции. На N-конце р53 присутствуют последовательности гомологичные последовательностям ранее исследованных факторов транскрипции ( Fields S., Jang S.K. 1990 , Raycroft L., Wu H., ea, 1990 , Vogelstein B., Kinzler K.W.,1992 ). Действительно, было показано, что домен на N-конце - мощный активатор транскрипции GAL4 оперона дрожжей, содержащего ДНК-связывающий участок ( Fields S., Jang S.K. 1990 , Raycroft L., Wu H., ea, 1990 ).
В настоящее время установлено, что р53 активирует транскрипцию ряда генов млекопитающих, которые регулируются промоторами, содержащими сайты связывания р53. Элементы, ответственные за специфическое связывание с белком р53, были выявлены в энхансере гена мышечной креатинкиназы ( Weintraub H., Haushka S.,ea, 1991 ), в протоонкогене mdm- 2 мыши ( Barac Y., Jeven T., ea, 1993 , Barac Y., Gottlieb E., ea, 1994 ) и в ряде других генов ( Zauberman A., Barak Y., ea, 1993 ).
С помощью вычитающей гибридизации , используя библиотеку кДНК клонов, был идентифицирован ген названный WAF-1 (wild-type p53- activated fragment), экспрессия которого индуцировалась нормальным р53 геном. Мутантный аллель из глиобластомы человека не влиял на экспрессию WAF-1. Сам ген WAF-1 также обладает свойствами супрессора, эволюционно консервативен ( El-Deiry W.S., Tokino T., ea, 1993 ).
Было установлено, что существует корреляция между способностью белка р53 к ДНК связыванию и к трансактивации транскрипции и супрессией роста опухолевых клеток . После трансфекции векторов, содержащих нормальные или мутантные аллели р53 в клетки аденокарциномы (линия Н1299) с двумя null аллелями р53 и в клетки рака прямой кишки человека (линия SW480), активация экспрессии гена-репортера САТ наблюдалась только после трансфекции нормального аллеля р53, в то время как экспрессия САТ после трансфекции мутантных аллелей была нулевой. Мутанты с низкой способностью к связыванию с ДНК, выделенные из опухолей и полученные in vitro, теряли не только способность к трансактивации, но в отличие от нормального аллеля, были неспособны подавлять рост опухолевых клеток ( Pietenpol J.A., Tokino T., ea, 1994 ).
Смотрите также:
