Плазма крови: белки, методы деления
В плазме человека обнаружено более 30 белков, в том числе альбумин , глобулины , фибриноген и др.
Качественное и количественное разделение белков плазмы производят при помощи электрофореза . Электрофорезом называется лвижение электрически заряженных частиц, находящихся во взвешенном состоянии в жидкой среде, под действием внешнего электрического поля. Молекулы белков построены из аминокислот, соединенных пептидными связями. Электрические свойства белков обусловлены ионизацией молекулы, причем амино-группа несет положительный заряд, а карбоксильная группа - отрицательный.
Электофоретическая подвижность белка зависит от приложенного напряжения, размеров и формы молекулы и ее электрического заряда.
Для того, чтобы не только разделить белки, но и определить молекулярный вес белков , применяется метод ультрацентрифугирования . При постоянном ускорении скорость оседания молекул зависит от их удельного веса и формы и плотности среды. При центрифугировании в градиенте плотности каждый из белков занимает в пробирке определенный уровень.
Еще более тонким способом деления белков является сочетание электорофореза с иммунопреципитацией ( иммуноэлектрофорез ). При этом электрофоретически разделенные фракции диффундируют в геле, в который внесена капля сыворотки, содержащей антитела . Когда белковый антиген встречается с антителами сыворотки, наступает преципитация - в геле появляется мутный беловатый участок. При помощи этого метода было показано, что электорфоретически однородные белковые фракции могут состоять из нескольких белков, различающихся по иммунофоретическим свойствам.
Смотрите также:
