Микроорганизмы: идентификация, иммунологические методы
Быстрыми и недорогими методами идентификации бактерий , экзотоксинов и вирусов по их белковым и полисахаридным антигенам являются латекс-агглютинация и ИФА .
Для исследования можно использовать как моноклональные, так и поликлональные антитела и проводить его как сразу после получения материала от больного, так и после культивирования ( бактерий - на плотных питательных средах, вирусов - в культуре клеток).
Прямая агглютинация - простой, но малочувствительный метод. Латекс-агглютинация и ИФА значительно превосходят его по чувствительности.
Поверхностные антигены бактериальных клеток (капсульные полисахариды, липополисахариды и некоторые другие) легко обнаруживаются в реакции агглютинации при добавлении антител к взвеси бактерий. Этот метод применяют для определения видовой принадлежности Shigella spp. и Salmonella spp . При ИФА обычно используют высокоспецифичные моноклональные антитела. Связавшиеся с антигенами антитела выявляют с помощью вторых антител, конъюгированных с ферментом (он превращает бесцветный хромогенный субстрат в окрашенный продукт). В данном случае фермент выполняет роль усилителя биологического сигнала , поэтому ИФА высокочувствителен.
Методы, основанные на выявлении антигенов с помощью антител, отличаются друг от друга лишь способом улавливания биологического сигнала . К сожалению, большинство из них не количественные, а качественные.
ИФА применяют и для определения бактериальных экзотоксинов, например токсинов Clostridium difficile в кале.
Смотрите также:
