Окраска по Цилю-Нильсену
Кислотоустойчивыми называют бактерий, которые окрашиваются в красный цвет карболовым фуксином и не обесцвечиваются подкисленным этанолом (метод Циля-Нильсена). В качестве контрастного красителя используют метиленовый синий. Окраска по Цилю-Нильсену позволяет выявить Mycobacterium spp. , а ее более чувствительные модификации - Nocardia spp. и некоторые другие кислотоустойчивые микроорганизмы.
Метод основан на проникновении карболового фуксина в микробную клетку через мембрану, включающую в себя восково-липидный слой, при одновременном воздействии нагревания и сильного протравливающего действия фенола. Последующее обесцвечивание мазка 25% раствором серной кислоты или 3% солянокислым спиртом приводит к обесцвечиванию всех некислотоустойчивых структур. Обесцвеченные элементы мазка докрашивают 0,3% раствором метиленового синего. Микобактерии не воспринимают обычные анилиновые красители, в результате чего кислотоустойчивые микобактерии окрашиваются в малиново-красный цвет, а другие микробы и клеточные элементы - в голубой.
По Цилю-Нильсену красят мазки мокроты, содержимого желудка, других биологических жидкостей, а также гистологические срезы. Чтобы отыскать розово-красных бактерий на голубом фоне, надо иметь опыт, так как даже в обогащенном материале их немного.
Более чувствительный метод - окраска флюоресцентными красителями (аурамином и родамином).
Смотрите также:
