Аденозиндезаминаза (ADA)
Карта белка аденозиндезаминазы
EC 3.5.4.4 . Рекомендуемое название: аденозиндезаминаза ( ADA ). Систематическое название: аденозин-аминогидролаза. Другие названия не встречаются.
Катализирует реакцию: ADENSIN+H2O=INOSN+NH3
В тканях человека и животных ADA содержится в виде множественных форм, различающихся по молекулярной массе [ Пестина Т.И.,1993 ] и изоэлектрическим точкам [ Van der Weyden M.B.,1976 ]. Низкомолекулярная изоформа ADA I у позвоночных животных и птиц имеет молекулярную массу 30-40 кДа [ Ma P.E.,1968 ; Fabianowska-Majewska K.,1992 ] и 35-38 кДа у человека.
Изоформа ADA 2 (промежуточная) имеет молекулярную массу около 110-114 кДа [ Ratech H.,1988 ; Пестина Т.И.,1993 ].
При остром лейкозе ADA 2 обнаружена исключительно в незрелых нелимфобластных клетках, а ADA I (40 кДа) в лимфоидных и нелимфоидных клетках [ Ratech H.,1988 ].
Высокомолекулярная изоформа ADA с массой 298 кДа преобладает в тканях с низкой активностью ADA. Этой формы много в почках (86%), легких (74%) [ Van der Weyden M.B.,1976 ], найдена также в фибробластах кожи.
В почках и клетках желудочно-кишечного тракта обнаружена форма с молекулярной массой 440 кДа [ Akedo H.,1972 ].
Изучение реакции, катализируемой ADA, с производными аденозина показало, что для скорости реакции важны таутомерные характеристики и предпочтительна анти-конформация [ Orozco M.,1990 ].
Кинетические характеристики 3-х форм ADA очень близки. Значения Km с аденозином составляют 95 мкМ для ADA I, 92 мкМ для ADA 2 , 90 мкМ для формы 298 кДа [ Van der Weyden M.B.,1976 ]. ADA I из лейкемических гранулоцитов имеет значения Km 48 мкМ с аденозином и 34 мкМ с дезоксиаденозином, ИЭТ = 4,4[ Wiginton A.,1981 ].
Значения Km для АDA I из эритроцитов человека было с аденозином 31 мкМ и с 5-C-метиладенозином (тало) - 28 мкМ [ Калиниченко Е.Н.,1988 ].
Значение Кm для ADA из эритроцитов человека с аденозином равно 25 мкМ, 2'-дезоксиаденозином - 7 мкМ, формицином A и хлорпуриннуклеотидом - 1000 мкМ [ Agarwal R.P.,1975 ].
Значение Кm для фермента из тканей мозга, сердца и печени голубя, мыши и крысы было в пределах 14-46 мкМ с аденозином.
Для ADA позвоночных животных отношение активности с дезоксиаденозином к активности с аденозином составляет 0,5-1,1 [ Fisher J.R.,1965 ].
Удельная активность изоформы ADA I выше, чем ADA 2 [ Gloria-Bottini F.,1989 ].
Изоформа ADA (110 кДа) эритроцитов в отличие от других форм нечувствительна к ингибитору эритро-9-(2-гидрокси-3-нонил)-аденозину [ Пестина Т.И.,1993 ].
Ингибиторы аденозиндезаминазы интенсивно изучаются.
Значения Ki для ADA из эритроцитов человека с субстратом аденозином составляли для коформицина 0,01 мкМ, инозина 116 мкМ, гуанозина 140 мкМ, 6-метилтиоинозина и N6-метиладенозина 270-275 мкМ, арабинозил-6-тиопурина 360 мкМ [ Agarwal R.P.,1975 ]. Эритро-9-(2-гидроксинон-3-ил)-аденин ингибировал ADA из лейкемических гранулоцитов конкурентно с Кi 15 нМ, дезоксикоформицин ингибировал ADA с Кi 60-90 pM с субстратами аденозином и дезоксиаденозином [ Wiginton A.,1981 ].
AMP, dAMP, ADP, dADP, ATP, dATP, цитозин, cAMP, cCMP, dCDP,CTP,dCTP не ингибировали ADA, а аденин и 6-метилмеркаптопурин ингибировали [ Пестина Т.И.,1993 ].
Окисленный глутатион и иодацетат не влияли на активность ADA из эритроцитов,а PCMB понижал активность [ Carbo R.M.,1988 ].
Для активности ADA кофактор не требуется.
Активность ADA I ингибируют катионы: Ni,Co(2+),Cu(2+),Ca(2+,Zn(2+), Mn(2+) [ Agarwal R.P.,1978 ].
В эритроцитах присутствует одна форма ADA, а в лимфоцитах -две [ Wiginton A.,1981 ].
Конъюгация с полиэтиленгликолем повышает стабильность аденозиндезаминазы.
Перспективно измерение активности аденозиндезаминазы - фермента, определяемого в жидкостях: синовиальной, перикардиальной, асцитической или спинно-мозговой. Основные продуценты аденозиндезаминазы - лимфоциты и моноциты. Определение активности аденозиндезаминазы в биологических жидкостях облегчает диагностику туберкулезного синовита , туберкулеза лимфатических узлов , туберкулезного менингита , туберкулезного серозита .
НЕДОСТАТОЧНОСТЬ АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ (ADA)
hADAT1 аденозин-дезаминаза человека: мРНК редактирование
Смотрите также:
