Туберкулез: иммунологические исследования, общие сведения
Существует целый ряд универсальных феноменов, препаратов и иммунологических тестов, которые первоначально были обнаружены именно при туберкулезе или на модели иммунного ответа на микобактерии. К ним относят БЦЖ и туберкулин , такой феномен, как кожная ГЗТ (туберкулиновые пробы - реакции Пирке и Манту ), реакцию на подкожное введение туберкулина сенсибилизированным животным (феномен Коха). Одни из первых антитела при инфекционном заболевании были также обнаружены при туберкулезе. Разумеется, чем глубже понимание механизмов противотуберкулезного иммунитета и их генетического контроля, тем шире может быть использование иммунологических методов и препаратов, воздействующих на иммунитет, для решения практических проблем фтизиатрии.
Самой важной и сложной практической проблемой в настоящее время считают выявление туберкулеза в процессе массового скрининга населения. Однако, несмотря на многочисленные сообщения об "успехах" (на ограниченном материале), нет подходящего для этих целей иммунологического метода (воспроизводимого в "любых руках") и препарата.
Иммунологические методы, в частности серологические исследования (определение антигенов, антител) и туберкулинопровокационные пробы, весьма широко используются в клинической практике. В табл. 13-4 перечислены задачи применения иммунологических исследований во фтизиатрии и методы, используемые для решения этих задач.
На первом месте среди иммунологических исследований, применяемых при дифференциальной диагностике, находятся серологические методы - определение антигенов и антител в разных средах организма ( табл. 13-5 ).
Специфичность определения антител к микобактериям туберкулеза зависит от используемых при иммунном анализе антигенов. Предложено значительное количество антигенов, самый первый из которых - туберкулин ППД :
- ППД и другие комплексные препараты из культуральной жидкости;
- ультразвуковой дезинтеграт;
- тритоновый экстракт и другие комплексные препараты клеточных стенок;
- корд-фактор (трегалоза-6,6-ди-миколат) ;
- фенольный и другие гликолипиды ;
- липополисахариды ;
- фибронектинсвязывающий антиген ;
- белки (чаще всего рекомбинантные); 81 КДА , 65 КДА , 38 КДА , 34 КДА , 30 КДА , 19 КДА , 18 КДА , 16 КДА , 15 КДА , 12 КДА белки и др.
В результате многолетних исследований российских и зарубежных ученых были выявлены основные закономерности антителообразования и эффективности серологической диагностики туберкулеза: чем более комплексный антиген, тем выше чувствительность и ниже специфичность тестов. Специфичность в разных странах различается в зависимости от инфицированности населения М. tuberculosis и нетуберкулезными микобактериями, от проведения вакцинации БЦЖ и др. У детей информативность серодиагностики ниже, чем у взрослых. При первичном туберкулезе (чаще дети) более информативно определение IgM , при вторичном - IgG . У ВИЧ -ннфицированных информативность серодиагностики при определении антител снижается. Эффективность определения антител зависит от ряда "клинических моментов": активности процесса (наличия или отсутствия "выделения" микобактерий, наличия полостей распада, степени инфильтрации), распространенности процесса, длительности его течения.
Чувствительность метода иммуноферментного анализа (ИФА) составляет около 70%. Недостаточная эффективность исследования связана с его низкой специфичностью. Ранее рассматривали возможности применения серологического скрининга в группах высокого риска, в частности среди лиц с посттуберкулезными изменениями в легких.
Для повышения специфичности ИФА продолжают поиски более специфичных антигенов, в том числе получаемых генно-инженерным путем: ESAT-6 и др. Применение строго специфичных антигенов ( 38 кДа , ESAT) повышает специфичность, но значительно уменьшает чувствительность анализа. Наряду с ИФА (экспериментальные лабораторные тест-системы. например Pathozyme ELISA kit) предложены также наборы иммунохроматографические с латеральной фильтрацией (Mycodot), а также другие подобные тесты (дот-анализ на мембране) с визуальной оценкой результата исследования. При проведении этих тестов анализ проходит в течение 10-30 мин; они не требуют специального оборудования, требуют визуальной оценки результатов, что связано с известной субъективностью. Указанные методы имеют примерно те же характеристики чувствительности и специфичности (70% и 90-93% соответственно), что и традиционный ИФА.
Применение методов иммунного анализа имеет определенное значение в качестве дополнительного, учитываемого в комплексе используемых методов, при дифференциальной диагностике туберкулеза, особенно при диагностике его внелегочных форм. Наибольшую эффективность метод ИФА имеет в диагностике туберкулезного менингита при исследовании спинномозговой жидкости. В этом случае чувствительность анализа составляет 80-85%, а специфичность 97-98%. Имеются сведения об эффективности определения антител к микобактериям туберкулеза в слезной жидкости при диагностике туберкулезного увеита .
Смотрите также:
