PAR-1: передача сигнала при активации тромбином
Рецептор тромбина PAR-1 связан с разными G-белками ( G aльфа q/11 , G0 , G альфа 12 , Gальфа 13 , Gi ), поэтому после его активации запускаются различные внутриклеточные системы передачи сигнала [ Dery, ea 1998 , Brass, ea 1997 ]. Активация тромбином PAR-1 во многих клетках реализуется вследствие связывания рецептора с G альфа q/11 и последующей активации фосфолипазы С ( PLC бета ). В результате гидролиза фосфатидилинозитол-4,5-дифосфата ( PIP2 ) образуются классические вторичные посредники: инозитол-1,4,5-трифосфат ( IР3 ), освобождающий Са2+ из внутриклеточных источников, и диацилглицерин ( DAG ), активирующий протеинкиназу С ( РКС ) [ Струкова ea 1977 , Grand, ea 1996 , Dery, ea 1998 , Brass, ea 1997 ]. В тромбоцитах РКС стимулирует фосфорилирование остатков Ser/Thr в легких цепях миозина (р20) и плекстрине (р47) , который может связывать РIР2 и блокировать дальнейший его гидролиз, тем самым играя определенную роль в регуляции актина цитоскелета [ Brass, ea 1997 ]. Вместе с тем РКС и Са2+ приводят к активации в тромбоцитах и экспозиции на поверхности интегринов альфа2bбета3 , связывающих фибриноген и стимулирующих новую передачу сигнала и агрегацию на поздних стадиях активации клеток [ Brass, ea 1997 , Shattil, ea 1999 ]. Тромбин вызывает критическое повышение степени фосфорилирования остатков Туr во многих белках тромбоцитов вследствие активации нерецепторных тирозинкиназ , таких как киназы Src (p60) , Syk (p72) и FAK (pl25) . Активация FAK связана с активацией интегринов альфа2bбета3 и связыванием фибриногена [ Fox, ea 1999 , Cichowski, ea 1999 ].
Экспозиция на поверхности тромбоцита рецептора фибриногена альфа2bбета3 и реорганизация цитоскелета контролируются низкомолекулярными GTP-связывающими белками : Ras , Rho и Rac [ Brass, ea 1997 , Shattil, ea 1999 ]. Активация Ras и родственных белков, а также МАР-киназ происходит несколькими путями, поскольку PAR-1 может быть связан с разными G- белками при стимуляции тромбином синтеза ДНК, пролиферации и дифференциации клеток [ Dery, ea 1998 ]. Тромбин вызывает в культивируемых фибробластах активацию нерецепторных тирозинкиназ, таких как Fyn и Src , которые взаимодействуют с рецепторными тирозинкиназами . Рецептор EGF (эпидермального фактора роста) является необходимым компонентом для опосредованного PAR митогенного сигнала тромбина и других лигандов - агонистов рецепторов, сопряженных с G-белками [ Cichowski, ea 1999 ]. Фосфорилирование тирозина адапторного белка She ведет к связыванию комплекса Grb2 - SOS (son of seven-less protein), который активирует Ras-белок (p21) [ Carpenter, ea 1999 ]. Далее следует каскад реакций фосфорилирования: р21ras фосфорилирует серин/треонин- Raf-l -киназу (или МАР-киназы киназы киназу). Эта киназа фосфорилирует МЕК-1 /-2 (киназу МАР-киназы), которая в свою очередь фосфорилирует ERK-1 /-2 (протеинкиназы, регулируемые внеклеточным сигналом) ( МАР-киназы ). В сложном и до конца не выясненном механизме передачи сигнала от рецепторных тирозинкиназ до МАР-киназ участвует множество регуляторов активности RAS [ Anderson, ea 1998 , Sternberg, ea 1998 ]. Конечным результатом этого сигнального пути являются активация факторов транскрипции и запуск генов раннего ответа, регулирующих митогенез [ Dery, ea 1998 , Carpenter, ea 1999 ]. Такие факторы транскрипции, как фактор NF-кВ , фактор раннего ответа 1 ( Egr-1 ), факторы Spl , АР-1 , регулируют транскрипцию тканевого фактора и внутриклеточной адгезивной молекулы 1 ( ICAM-1 ) [ Prydz, ea 1999 , Lu, ea 1998 , Chen, ea 1996 , Mackman, ea 1997 ]. Факторы Spl и АР-2 влияют на транскрипцию PDGF , TGF-бета1 , u-PA [ Lu, ea 1998 , Chen, ea 1996 ]. Для каждого из этих белков в структуре регулируемого гена имеются участки связывания, определяющие взаимодействие гена и белка.
Смотрите также:
